凍干外泌體誘導(dǎo)膠原化和抗衰老及凍干要點要點

凍干外泌體誘導(dǎo)膠原化和抗衰老：皮膚紫外線損傷是皮膚老化過程中紫外線損傷的累積，是內(nèi)源性衰老與紫外線輻射相互作用的結(jié)果，具有組織解體、碎裂和膠原束分散等特征。基質(zhì)金屬蛋白酶 (MMP) 可特異性降解幾乎所有細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 成分，并在皮膚光老化中發(fā)揮重要作用。光老化會逐漸損害人真皮成纖維細(xì)胞 (HDF) 的功能，后者會在真皮中產(chǎn)生膠原蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源的外泌體（iPSCs-Exo） 可以增加光老化 HDFs 中 I 型膠原蛋白的表達(dá)水平，降低 SA-β-Gal、MMP-1/3 的表達(dá)水平，恢復(fù)衰老 HDFs 中 I 型膠原蛋白的表達(dá)。外泌體通過冷凍干燥技術(shù)，在低溫低壓下移除水分，從液態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)粉末，在長期儲存中保持其生物活性和結(jié)構(gòu)完整性。

外泌體凍干時的關(guān)鍵要點：1. 要制備高純度、高濃度的外泌體溶液；2.選擇凍干保護(hù)劑時通常使用1%-5% (w/v) 的海藻糖溶解在PBS或無酶水中。優(yōu)化配方需要通過實驗確定3.  預(yù)凍終點溫度必須低于樣品的共晶點或玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，確保凍結(jié)。通常需要維持在-40°C以下數(shù)小時。4.外泌體品溫度與擱板溫度接近，且冷凝器捕獲的水分不再顯著增加時，表明一次干燥基本完成；5.外泌體的凍干后的制品的殘留水分是關(guān)鍵指標(biāo)，一般需要控制在1%-3%之間。水分過高會影響穩(wěn)定性，過低可能導(dǎo)致過度干燥而失活；6. 密封后的凍干粉應(yīng)在-20°C或-80°C的干燥、避光環(huán)境中長期保存。

具有成熟的外泌體凍干工藝技術(shù)，可提供上下游的外泌體凍干技術(shù)，包括提供外泌體凍干保護(hù)劑篩選，凍干工藝優(yōu)化，凍干放大生產(chǎn)。