凍干外泌體促進血管生成以及凍干保護劑

凍干外泌體促進血管生成

血管生成為修復(fù)組織提供氧氣并提供營養(yǎng)。血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖是其重要組成部分。此外，它還需要與血管生成、內(nèi)皮細(xì)胞和周圍的細(xì)胞外基質(zhì)環(huán)境相互作用。

創(chuàng)面對血管內(nèi)皮細(xì)胞具有趨化作用，使內(nèi)皮細(xì)胞穿透血管基底膜，進入細(xì)胞外基質(zhì)，形成管腔樣結(jié)構(gòu)并不斷延伸、分支，最終生成新的血管網(wǎng)。在此過程中，人間充質(zhì)干細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞來源的外泌體可增加創(chuàng)面新生血管的密度，這與促進內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移有關(guān)。

外泌體在凍干機需要選擇的保護劑，糖類保護劑有海藻糖（4% - 50mM）、山梨糖醇（10%）、蔗糖、甘露醇等；氨基酸包括谷氨酸、精氨酸、甘氨酸等（0.01M - 0.5M）；血清成分如1%胎牛血清（FBS）可有效避免冷凍休克；脂質(zhì)體方面，部分提出在復(fù)蘇液中添加脂質(zhì)體（1% - 20%），用于破損囊泡膜的修復(fù)。

復(fù)合保護劑配方比單一保護劑更有效，如甘露醇+山梨醇（1% - 10% + 3% - 15%）；海藻糖與外泌體膜脂雙分子層結(jié)合，防止低溫導(dǎo)致的脂質(zhì)重排和囊泡聚集；添加維生素B等成分可進一步提升外泌體在常溫下的穩(wěn)定性；保護劑濃度需根據(jù)外泌體來源和特性進行調(diào)整，如間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體凍干保護劑配方為1% - 6%甘露醇與3% - 15%山梨醇組合。

提供外泌體凍干工藝摸索，外泌體凍干工藝開發(fā)，外泌體凍干放大生產(chǎn)等。